经典AV三级在线观看 二抗特异性可考虑方面

二抗特异性是指一抗或免疫球蛋白被二抗识别的区域或链。可能需要实际运用的时候在考虑以下方面：

1、抗IgG (H+L):

一种具有(H+L)标记的二抗，靶向IgG分子的重链和轻链(即Fc和Fab区域)。这些抗体也会与其他类(如IgE、IgD等)发生反应，因为这些类之间共享轻链。更广泛的表位识别(H+L)二抗使其适用于大多数需要二抗的免疫分析。

2、抗igg Fc片段或重链:

与(H+L)二抗不同，以靶免疫球蛋白Fc区域或重链为靶点的二抗具有类特异性，不会与其他类免疫球蛋白发生反应。针对Fc片段的二抗被吸附在F(ab’)2片段上。如果打算在ip后进行western blot分析，建议使用重链特异性二抗来检测大于55kd或小于45kd的蛋白的表达。针对(H+L)区域的二抗将识别用于免疫沉淀的一抗的还原和变性重链(50 kDa)和轻链(25 kDa)。此外，Fab片段抗fc二抗可用于一抗在多次标记实验孵育前预标记。

3、抗IgG F(ab’)2片段:

一种具有F(ab’)2标记的二抗，靶向于IgG一抗的F(ab’)2区。这些抗体被吸附在Fc片段上，但由于识别了F(ab)区域的共享轻链，它们会与其他类发生反应。

4、抗IgG轻链:

一种轻链特异性二抗靶向IgG轻链(kappa或lambda)。这些抗体不与一抗重链反应，但识别其他免疫球蛋白类的共享轻链。例如，山羊抗人IgG Kappa轻链二抗不仅能识别IgG亚类，还能识别IgA、IgD、IgE、IgM等轻链。在ip后进行western blot分析时，建议使用轻链特异性二抗来检测大于30 kDa蛋白的表达。western blot分析中使用的A (H+L)特异性二抗将识别免疫沉淀步骤中使用的一抗的重链(50 kDa)和轻链(25 kDa)。使用轻链特异性二抗，去除50 kDa的重链带，可以清晰的检测到大于30 kDa的蛋白。