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SE系列电泳仪蛋白电泳成套试剂配制说明

阅读:895发布时间:2007-8-15

1.电极缓冲液的配制
      剪开1号试剂袋,将试剂倒入2000ml烧杯中,用约50ml蒸馏水分数次将试剂袋中残留试剂洗入烧杯;敲开2号针剂瓶,将试剂倒入同一烧杯中,用约50ml蒸馏水分三次以上将针剂瓶中残留试剂洗入烧杯,加入约1600ml蒸馏水,搅拌至*溶解,用蒸馏水定容至2000ml混匀。
注:该配制量够2个电泳槽使用有余,测纯度时400粒样品需同法配制2份该溶液,该溶液临用前现配,可重复使用6次。

2.凝胶贮备液的配制:
      a. 贮备液A: 戴上乳胶手套,在台式天平上称取90克丙烯酰胺和3克N,N洹羌谆0罚谷?00ml烧杯中,加入350ml蒸馏水,搅拌至*溶解,约需0.5小时,用蒸馏水准确定容至500ml,过滤溶液于棕色瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量够测4个样品纯度使用,每个样品400粒,以下同,保存期为1个月。
      b. 贮备液B:取出3号针剂瓶,用镊子敲开,加入少量蒸馏水溶解,倒入150ml烧杯中,用约20ml蒸馏水分三次以上将针剂瓶中残留试剂洗入烧杯,再加入50ml蒸馏水,搅拌混匀,用蒸馏水准确定容至100ml,倒入棕色瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量能够测4个样品,保存期一个月,保存中如出现混浊或沉淀,则需重新配制。
      c. 贮备液C:剪开4号试剂袋,将试剂倒入250ml烧杯中,用约30ml蒸馏水分数次将试剂袋中残留试剂洗入烧杯中,再加入150ml蒸馏水,搅拌至*溶解,用蒸馏水准确定容至200ml,倒入棕色瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量够测4个样品纯度,保存期一个月。
      d. 贮备液D:剪开5号试剂袋,将试剂倒入100ml烧杯中,用约30ml蒸馏水分数次将试剂袋中残留试剂洗入烧杯,搅拌至*溶解,用蒸馏水准确定容至50ml,倒入棕色瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量够测5个样品纯度,保存期一个月。
      e. 贮备液E: 取出6号针剂瓶,用镊子敲开,加入少量蒸馏水溶解,倒入100ml烧杯中,用30ml蒸馏水分三次以上将针剂中残留试剂洗入烧杯中,混合均匀,用蒸馏水准确定容至50ml,倒入棕色瓶,放冰箱内保存。
注:该配制量够测5个样品纯度,其他事项同贮备液B注。
      f. 贮备液F:戴上乳胶手套,剪开7号试剂袋,将试剂倒入150ml烧杯中,用约60~70ml蒸馏水分数次将试剂袋中残留试剂洗入烧杯,搅拌至*溶解,约需0.5小时,用蒸馏水准确定容至100ml,滤入棕色瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量够测5个样品纯度,保存期一个月。
      g. 贮备液G:将8号小塑料瓶剪开,将试剂挤入棕色小滴瓶,用移液管加9ml蒸馏水,放冰箱内保存。
注:该配制量够测10个样品纯度,保存期一个月。

3.样品提取液的配制
      剪开9号试剂袋,将试剂倒入1000ml烧杯中,用约100ml蒸馏水分数次将残留试剂洗入烧杯中,然后加入约700ml蒸馏水,搅拌至*溶解,放在电炉上加热至沸,放冷,用新煮沸过的冷蒸馏水定容至1000ml,过滤提取液于试剂瓶中,放冰箱内保存。
注:该配制量够测定2~3个样品纯度,保存期为1个月以上,如保存过程中出现混浊,则需重新配制。

4.染色液配方:
      将考马斯亮蓝R-250配成2%W/V的乙醇溶液,用滤纸过滤,放入试瓶中备用。另用蒸馏水配制10%W/V的三氯乙酸溶液。使用时,取10ml考马斯亮蓝R-250的乙醇溶液,加到200ml三氯乙酸溶液中,混匀。

 贮  备  液
   编   号
                   分   离   胶                   浓   缩   胶
   一块板取胶量   五块板取胶量   一块板取胶量   五块板取胶量
       A        12.5ml        62.5ml  
       B          2.5ml        12.5ml  
       C             5ml           25ml  
       D              1ml            5ml
       E              1ml            5ml
       F              2ml          10ml
       G            20μl          100μl           40μl         200μl

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