简介
卟啉（Porphyrin）是一类由四个吡咯类亚基的α-碳原子通过次甲基桥（=CH-）互联而形成的大分子杂环化合物。其母体化合物为卟吩（porphin，C20H14N4），有取代基的卟吩即称为卟啉。卟啉环有26个π电子，是一个高度共轭的体系，并因此显深色。“卟啉”一词是对其英文名称porphyrin的音译，其英文名则源于希腊语单词，意为紫色，因此卟啉也被称作紫质。由于卟啉与金属离子极易形成1:1的配合物的特性，因而卟啉类化合物在模拟生物光合作用、太阳能电池、有机电致发光、光导材料以及抗肿瘤药物研发等方面应用广泛。
图1. zui简单的卟啉——卟吩的结构式
该类化合物全合成工艺复杂，反应收率较低，反应后会产生大量的副产物，因此后期的纯化需要十分小心才能避免样品的大量损失。对于反应产物的纯化，研究人员大多采用手工过柱方式：即使用大量硅胶装填一根很长的玻璃柱，利用重力作为驱动力来纯化该类化合物（参见图2）。手工方法的弊端是很明显的：采用过长的玻璃柱，一方面操作繁琐，不安全；另一方面由于底物颜色深，往往整个柱床呈现很深的颜色， 致使对分离进程的把握难度加大，不利于判断目标组分的位置。
针对手工过柱方式的缺点，常州三泰科技有限公司的应用技术研究人员利用公司生产的快速液相制备色谱系统：SepaBeanTM machine，并采用预装填了硅胶填料的Flash纯化柱，对卟啉类化合物样品进行了分离纯化，实验结果表明：采用自动化方式对卟啉类化合物样品进行分离纯化，不仅可以获得良好的分离效果，而且可以节省大量时间，提高研究工作的效率。
图2. 手工过柱方式纯化卟啉类化合物的实验装置
实验部分
样品来自于某高校合成化学实验室，具体合成反应式如图3所示。
图3. 某卟啉类化合物的合成反应式
在合成反应完成后，研究人员利用一台快速液相制备色谱系统SepaBeanTM machine对合成产物进行了制备纯化，实验参数设置如表1所示。
表1. 制备纯化实验参数设置
结果与讨论
图4. 某卟啉类化合物样品的Flash制备分离图谱
在Flash制备纯化实验中，使用40g SepaFlash® HP系列正相硅胶柱运行了约 22个柱体积（CV），自动收集目标组分，样品的Flash制备分离图谱如图4所示。通过分析样品的TLC点板信息和Flash分离图谱，实验结果表明使用相对小粒径（25-40μm）的无定形硅胶填料预装柱对卟啉这类复杂化合物的分离起到很大的帮助，目标化合物与前后的杂质点可以达到基线分离。此外，SepaBeanTM machine操控软件自带的根据样品Rf值推荐洗脱梯度的功能，使得整个Flash制备纯化过程十分简便且。用户只需要简单输入待纯化样品中各组分的Rf值（经TLC点板实验获得）并选好洗脱溶剂，无需再手动设置洗脱梯度以及对洗脱梯度进行繁琐的反复优化，机器内置软件即可自动生成推荐的洗脱梯度，在此基础上仅需一次实验即可获得令人满意的分离效果。整个分离纯化过程较以往的手动分离方式可以节省大约三分之二的分离时间，从而大大提高了研究工作的效率。
关于SepaFlash® HP系列正相硅胶柱系列产品
常州三泰科技公司的SepaFlash® HP系列正相硅胶柱产品具有多种规格（参见表2）。
表2. SepaFlash® HP系列正相硅胶柱参数
（填料: High-efficiency irregular silica, 25-40μm, 60Å）
（本文作者为CBG应用技术研究中心：仇文军，徐波。有任何疑问，都可以和我们一起探讨）
