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经典三级视频在线观看 筛选基因让酵母生产更多的蛋白质

时间:2019/5/15阅读:177
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                                      经典三级视频在线观看 筛选基因让酵母生产更多的蛋白质

    研究人员已经鉴定出9个基因靶点,通过组合沉默使工程酵母细胞中的蛋白质产量提高了2.2倍。

   “这个概念可以推广到其他酵母蛋白生产者,甚至一些丝状真菌和哺乳动物细胞工厂。任何一个与蛋白质生产者合作的组织都可以利用这些发现,”研究人员说。

       提高了一种模型蛋白,α-淀粉酶(α-amylase)的酵母生产,证明了细胞内目标蛋白(重组蛋白)的总生产价值。

沉默是一种强有力的工具

    通过RNA干扰(RNAi)确定几种适合沉默的基因靶点,获得优化的酵母菌株。通过构建与基因互补的短/长链RNA,干扰RNA与互补的mRNA相互作用并引导其降解,从而减少需要翻译的mRNA,降低靶基因的表达。

    RNAi介导的表达下调是一个有效的合理筛选新基因靶点的有力工具,因为它既便宜又快速。

广泛的文库筛选确定了9个目标基因

    通过观察α-淀粉酶分泌的增强作为重组蛋白生产改善的指标,研究人员分析了酵母中大约243000种沉默效应物。

    通过对含有分泌这种酶的单个细胞的微小液滴进行广泛筛选,研究人员成功地筛选出了9个基因,这些基因受抑制后,改善了蛋白质的分泌。这些基因参与细胞代谢、细胞周期以及蛋白质修饰和降解。

    所有这些基因在不同的下调水平表达时都会影响重组蛋白的产生。研究人员说:“在试图建立用于生产工业酶或生物制药蛋白的优化酵母细胞工厂时,这些知识非常重要。”

    科学家们首先筛选出有益的RNAi目标。之后,他们研究了沉默的组合,得出了所谓的半理性方法(semi-rational approach)。 

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